1. 主題內(nèi)容和適用范圍

本程序規(guī)定了滲透壓摩爾濃度的測(cè)定方法和注意事項(xiàng)，使其規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化，并描述了更改信息。
本程序適用于滲透壓摩爾濃度的測(cè)定法的操作。
 

2. 引用標(biāo)準(zhǔn)

中國(guó)藥典 2010 年版二部附錄Ⅸ G “滲透壓摩爾濃度測(cè)定法”、中國(guó)藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn) 操作規(guī)范 2010 年版 P262“滲透壓摩爾濃度測(cè)定法”。
 

3. 簡(jiǎn)介

生物膜，例如人體的細(xì)胞膜或毛細(xì)管壁，一般具有半透膜的性質(zhì)，溶劑通過(guò)半透膜由低濃度溶液向高濃度溶液擴(kuò)散的現(xiàn)象稱(chēng)為滲透，阻止?jié)B透所需施加的壓力，即為滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓）。在涉及溶質(zhì)的擴(kuò)散或通過(guò)生物膜的液體轉(zhuǎn)運(yùn)各種生物過(guò)程中，滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓）都起著及其重要的作用。因此，在制備注射劑、液體型滴眼液等藥物制劑時(shí)，必須關(guān)注其滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓）。凡處方中添加了滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓）調(diào)節(jié)劑的制劑，均應(yīng)控制其滲透壓摩爾濃度。
 
靜脈輸液、營(yíng)養(yǎng)液、電解質(zhì)或滲透利尿藥（如甘露醇注射液）等制劑，應(yīng)在藥品說(shuō)明書(shū)上表明其滲透壓摩爾濃度，以便臨床醫(yī)生根據(jù)實(shí)際需要對(duì)所用制劑進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶幹?。正常人體血液的滲透壓摩爾濃度范圍為 285～310mOsom/kg，0.9%氯化鈉溶液或 5% 葡萄糖溶液的滲透壓摩爾濃度與人體血液相當(dāng)。雖然人體本身具有一定的滲透壓調(diào)節(jié)能力，但靜脈輸液、眼用溶液應(yīng)盡可能與血液等滲。 除另有規(guī)定外，等滲的范圍一般為260～320mOsmol/kg；冰點(diǎn)下降0.48～0.59℃或滲透壓比0.9～1.1.甘露醇注射液、氨基酸注射液等高滲注射劑及注射用無(wú)菌粉末滲透壓摩爾濃度的限值，可根據(jù)生產(chǎn)工藝及臨床使用情況做出相應(yīng)的規(guī)定。
 

4. 滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓）與滲透壓摩爾濃度

溶液的滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓），依賴(lài)于溶液中粒子的數(shù)量，是溶液的依數(shù)性之一，通常以滲透壓摩爾濃度（Osmolality）來(lái)表示，它反映的是溶液中各種溶質(zhì)對(duì)溶液滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓）貢獻(xiàn)的總和。滲透壓摩爾濃度的單位，通常以每千克溶劑中溶質(zhì)的毫滲透壓摩爾來(lái)表示，可按下列公式計(jì)算毫滲透壓摩爾濃度（mOsmol/kg）：
 
毫滲透壓摩爾濃度（mOsmol/kg）=（每千克溶劑中溶解的溶質(zhì)克數(shù)/分子量）×n× 1000
式中，n 為一個(gè)溶質(zhì)分子溶解并解離時(shí)形成的粒子數(shù)。在理想溶液中，例如葡萄糖 n=1，氯化鈉或硫酸鎂n=2，氯化鈣n=3，枸櫞酸鈉 n=4。
 
在生理范圍及稀溶液中，其滲透壓摩爾濃度與理想狀態(tài)下的計(jì)算值偏差較??；隨著溶液濃度的增加，與計(jì)算值比較，實(shí)際滲透壓摩爾濃度。例如 0.9%氯化鈉注射液，按上式計(jì)算，毫滲透壓摩爾濃度是2×1000×9/58.4=308mOsmol/kg， 而實(shí)際上在此溶度時(shí)氯化鈉溶液的n 稍小于2，其實(shí)際測(cè)得值是286mOsmol/kg；這是由于在此濃度條件下，一個(gè)氯化鈉分子解離所形成的二個(gè)離子會(huì)發(fā)生某種程度的締合，使有效離子數(shù)減少的緣故。復(fù)雜混合物（如水解蛋白注射液）的理論滲透壓摩爾濃度不容易計(jì)算，因此通常采用實(shí)際測(cè)定值表示。
 
理想的稀溶液具有四個(gè)依數(shù)性質(zhì)，即滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓）、沸點(diǎn)上升、冰點(diǎn)下降和蒸氣壓下降。所謂依數(shù)性，是指其性質(zhì)決定于溶質(zhì)的粒子數(shù)而與溶質(zhì)本身無(wú)關(guān)。這四個(gè)依數(shù)性質(zhì)均與溶液的重量摩爾濃度成正比。通常采用測(cè)量溶液的冰點(diǎn)下降來(lái)間接測(cè)定其滲透壓摩爾濃度。在理想的稀溶液中，冰點(diǎn)下降符合ΔTf=Kf•m的關(guān)系，式中，ΔTf為冰點(diǎn)下降值，Kf為冰點(diǎn)下降常數(shù)（當(dāng)水為溶劑時(shí)為1.86），m為重量摩爾濃度。而滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓）符合P0=K0•m的關(guān)系，式中，P0為滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓），K0為滲透壓常數(shù)，m為溶液的重量摩爾濃度。由于兩式中的濃度等同，故可以用冰點(diǎn)下降法測(cè)定溶液的滲透壓摩爾濃度。
 

5. 滲透壓摩爾濃度測(cè)定儀（又稱(chēng)滲透壓儀，滲透壓測(cè)定儀，摩爾濃度滲透壓儀）

采用冰點(diǎn)下降的原理設(shè)計(jì)的滲透壓摩爾濃度測(cè)定儀（又稱(chēng)滲透壓儀，滲透壓測(cè)定儀，摩爾濃度滲透壓儀）通常由制冷系統(tǒng)、用來(lái)測(cè)定電流或電位差的熱敏探頭和振蕩器（或金屬探針）組成。測(cè)定時(shí)將測(cè)定探頭進(jìn)入供試溶液的中心，并降至儀器的冷卻槽中。啟動(dòng)制冷系統(tǒng)，當(dāng)供試溶液的溫度降至凝固點(diǎn)以下時(shí)， 滲透壓儀采用振蕩器（或金屬探針）誘導(dǎo)溶液結(jié)冰，自動(dòng)記錄冰點(diǎn)下降的溫度。滲透壓儀（滲透壓摩爾濃度測(cè)定儀，滲透壓測(cè)定儀，摩爾濃度滲透壓儀）顯示的測(cè)定值可以是冰點(diǎn)下降的溫度，也可以是滲透壓摩爾濃度。
 

6. 操作程序

6.1 滲透壓摩爾濃度測(cè)定
6.1.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
取基準(zhǔn)氯化鈉試劑，于 500～650℃干燥 40～50min，置干燥器（硅膠）中防冷至室溫。根據(jù)需要，按表 1 所列數(shù)據(jù)精密稱(chēng)取適量，溶于 1kg 水中，搖勻。

表1 滲透壓摩爾濃度測(cè)定儀校正用標(biāo)準(zhǔn)溶液

每 1kg 水中氯化鈉的重量（g）	毫滲透壓摩爾濃度（mOsmol/kg）	冰點(diǎn)下降溫度 ΔT（℃）
3.087	100	0.186
6.260	200	0.372
9.463	300	0.558
12.684	400	0.744
15.916	500	0.930
19.147	600	1.116
22.380	700	1.302

6.1.2 供試品溶液的制備
供試品如為液體，通?？芍苯訙y(cè)定，但如其滲透壓摩爾濃度大于 700mOsmol/kg 或?yàn)闈馊芤?，可用適宜的溶劑（通常為注射用水）稀釋至表中測(cè) 定范圍內(nèi)；如為固體（如注射用無(wú)菌粉末），可采用藥品標(biāo)簽或說(shuō)明書(shū)中的規(guī)定溶劑溶 解并稀釋至上表測(cè)定范圍內(nèi)。需特別注意的是，溶液經(jīng)稀釋后，粒子間的相互作用于原溶液有所不同，一般不能簡(jiǎn)單地將稀釋后溶液滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓）的測(cè)定值乘以稀釋倍數(shù)來(lái)計(jì)算原溶 液的滲透壓摩爾濃度。例如，甘露醇注射液、氨基酸注射液等高滲溶液和注射用無(wú)菌粉 末可用適宜的溶劑（如注射用水、5%葡萄糖注射液或 0.9%氯化鈉注射液等）經(jīng)溶解、稀 釋后測(cè)定，并按照正文品種各論項(xiàng)下規(guī)定具體的溶解或稀釋方法。
 
6.1.3 測(cè)定法
按儀器說(shuō)明書(shū)操作，首先取適量新沸防冷的水調(diào)節(jié)儀器零點(diǎn)，然后由表中選擇兩種標(biāo)準(zhǔn)溶液校正儀器，再測(cè)定供試品溶液的滲透壓摩爾濃度比或冰點(diǎn)下降值。注：（供試品溶液的滲透壓摩爾濃度比應(yīng)介于兩種標(biāo)準(zhǔn)溶液之間；0～100mOsmol/kg 在測(cè)定范圍內(nèi)，水（0 mOsmol/kg）可以作為一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的使用）。
 
6.2 滲透壓摩爾濃度比的測(cè)定
供試品溶液與 0.9% （g/ml）氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的滲透壓摩爾濃度比率稱(chēng)為毫滲透壓摩爾濃度比。用滲透壓摩爾濃度測(cè)定儀分別測(cè)得供試品溶液與0.9%（g/ml）氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的滲透壓摩爾濃度OT 與OS，方法同 4.3。并用下列公式計(jì)算滲透壓摩爾濃度比：
滲透壓摩爾濃度比=OT/OS
 
毫滲透壓摩爾濃度比的測(cè)定用標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
精密稱(chēng)取經(jīng)500～650℃干燥40～50min并置干燥器 （硅膠） 中放冷的基準(zhǔn)氯化鈉 0.900g，加水使溶解并稀釋至 100ml，搖勻。
 

7. 注意事項(xiàng)

7.1 為了使測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確并有良好的重現(xiàn)性，應(yīng)按各儀器說(shuō)明書(shū)規(guī)定的取樣體積準(zhǔn)確取樣至測(cè)定管中，避免測(cè)定溶液中存在氣泡。在每次測(cè)定后應(yīng)用水清洗熱敏探頭并用濾紙吸干。
 
7.2 如重復(fù)測(cè)定一份樣品，需重新取樣至另一干凈的測(cè)定管中，因?yàn)榻抵帘c(diǎn)再融化的溶液， 溶質(zhì)可能已不是均勻分布于溶劑中， 易導(dǎo)致過(guò)早結(jié)晶， 影響測(cè)定結(jié)果的重現(xiàn)性。
 

8. 更改信息